Bernt Holtsmark (født desember 1859 i Asker, død 1941) var stortingsrepresentant for Frisinnede Venstre og landbrukslærer.
I 1887 grunnla han en landbruksskole sammen med broren Wilhelm Holtsmark på Sem i Asker. Brødrene drev den sammen fram til 1914. Bernt Holtsmark eide også gården Tveiter, som han hadde overtatt fra faren. Holtsmarks vei ved Tveiter er oppkalt etter han.
Bernt Holtsmark representerte Frisinnede Venstre på Stortinget i periodene 1903–1909 og 1916–1921. Han var landbruksminister i Wollert Konows regjering fra 1910 til 1912.
Han var først gift med Johanne f. Koller (1866-1917). Etter at hun døde, giftet han seg i 1919 opp igjen med Ingeborg Mathilde Bye.